本頁描述的產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用,不用于臨床,非醫(yī)療器械,不做其他用途。
貨號(hào) | 名稱 | 價(jià)格 |
HL50162.3 | 細(xì)胞IKKβ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C) | 3600 |
產(chǎn)品內(nèi)容
清理液(Reagent A) 最好毫升
裂解液(Reagent B) 毫升
緩沖液(Reagent C) 毫升
酶促液(Reagent D) 微升
反應(yīng)液(Reagent E) 微升
底物液(Reagent F) 微升
陰性液(Reagent G) 微升
專性液(Reagent H) 微升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方式
保存清理液(Reagent A)在4℃冰箱里;其余的保存在-20℃冰箱里,嚴(yán)格避免光照和反復(fù)凍融;有效保證6月
用戶自備
IKKβ激酶:用于抑制劑篩選
1.5毫升離心管:用于樣品保存的容器
15毫升錐形離心管:用于樣品處理的容器
細(xì)胞刮脫棒:用于貼壁細(xì)胞脫離
(微型)臺(tái)式離心機(jī):用于組織預(yù)處理
100微升1厘米光徑比色皿或96孔板:用于光度分析操作的容器
分光光度儀或酶標(biāo)儀:用于樣品光度分析
實(shí)驗(yàn)步驟
一、 待測樣品準(zhǔn)備
1. 準(zhǔn)備好75cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶或100mm細(xì)胞培養(yǎng)皿的待測培養(yǎng)細(xì)胞(1至5 X 107細(xì)胞)
2. 小心加入xx毫升清理液(Reagent A),覆蓋生長表面
3. 小心抽去清理液
4. 使用細(xì)胞刮脫棒輕柔刮脫細(xì)胞(注意:避免使用胰酶消化)
5. 加入xx毫升清理液(Reagent A),混勻細(xì)胞
6. 移入到預(yù)冷的15毫升錐形離心管(注意:懸浮細(xì)胞從這一步驟開始)
7. 放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為300g
8. 小心抽去上清液
9. 加入xx微升裂解液(Reagent B),充分混勻
10. 轉(zhuǎn)移到預(yù)冷的1.5毫升離心管
11. 強(qiáng)力渦旋震蕩15秒
12. 置于冰槽里孵育30分鐘
13. 放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如eppendorf 5415)
14. 小心移取500微升上清液到新的預(yù)冷的1.5毫升離心管
15. 移取10微升進(jìn)行蛋白定量檢測(注意:建議使用 Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒-HL30030.1)
16. 即刻放進(jìn)-70℃保存或置于冰槽里繼續(xù)后續(xù)操作