主要用途
細胞NADPH氧化酶活性化學發光法定量檢測試劑是一種旨在使用化學發光分子光澤精受到NADPH氧化酶催化產生的超氧陰離子O2-的還原,然后在其還原過程中釋放能量,由此測定樣品中特異性氧化還原酶(oxidoreductase)的活性,即采用發光探測儀(Luminometer)測定其相對冷光單位(RLU)的變化,以此進行測算酶活性的而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種細胞樣品(動物或人體)還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NADPH氧化酶)的特異活性檢測。用于免疫、血液研究、蛋白組學、病理生理學等研究。產品不含污染性蛋白酶,嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩定,反應優化,檢測敏感。
技術背景
NADPH氧化酶,通常稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase;NADPH oxidase;EC1.6.3.1)或還原型輔酶II氧化酶,是機體防御機制中的重要元素。NADPH氧化酶由6個亞體構成:Rho GTP酶(Rho guanosine triphosphatase)和5個phox(吞噬細胞氧化酶;phagocytic oxidase)。其中主要包含細胞膜嵌合蛋白質分子(gp91phox、p22phox、flavocytochrome b558等),以及位在細胞質內的蛋白質分子(p47phox、p67phox、p40phox、Rac1、Rac2等)。其特征性的酶活性是超氧化物歧化酶敏感的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶。細胞膜上的NADPH氧化酶被激活,將還原型輔酶Ⅱ(NADPH)轉變為氧化型輔酶Ⅱ(NADP),氧分子則獲得電子形成超氧陰離子O2-,由O2-又可生成H2O2和OH-。其超氧陰離子產物具有殺死微生物的功能。NADPH氧化酶異常將導致慢性肉芽腫病(Chronic Granulomatous Disease;CGD)。基于底物NADPH,受到NADPH氧化酶的催化作用,產生超氧陰離子O2-,進而超氧陰離子將化學發光分子光澤精(lucigenin)還原,并釋放能量,通過發光探測儀(Luminometer;470nm波長)檢測,來測定NADPH氧化酶的活性。其反應方式為: |