主要用途
細菌琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在使用合成電子受體染料,通過反應系統測定染料還原后峰值的降低,即采用比色法測算樣品中單位酶活性的而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種細菌菌株裂解懸液和膜蛋白樣品琥珀酸脫氫酶的特異性活性檢測。用于衰老、能量代謝、蛋白組學、發酵分析等研究。產品不含污染性蛋白酶,嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩定,反應優化,檢測敏感。
技術背景
琥珀酸脫氫酶(succinate dehydrogenase;SDH;EC 1.3.99.1)是三羧酸循環(tricarboxylic acid cycle;TCA)或Krebs循環中與細胞線粒體膜相關的重要元素,位于線粒體內膜,參與細胞呼吸鏈。細菌琥珀酸脫氫酶,又稱為SdhCDAB,為膜結合性蛋白,分為周邊(peripheral)和跨膜(transmembrane)部分,其中周邊親水部分由SdhA和SdhB亞體組成:SdhA亞體含有黃素蛋白(flavoprotein),是琥珀酸的活性部位;SdhB含有鐵硫蛋白(iron-sulfur protein),進行電子傳遞;跨膜疏水部分由SdhC和SdhD亞體組成:SdhC含有亞鐵血紅素-B(Heme-B),SdhD含有泛醌(ubiquinone)結合部位(Q部位)。其作用在于參與三羧酸循環(TCA cycle)和呼吸鏈活動。琥珀酸脫氫酶催化琥珀酸(succinate)的氧化反應,產生延胡索酸(furmarate),通過黃素腺嘌呤二核苷酸(Flavin Adenine Dinucleotide;FAD)傳遞電子。基于琥珀酸脫氫酶的反應原理,使用人工電子受體染料二氯靛酚鈉(2,6-Dichloroindophenol sodium;DCIP),接受來自還原型黃素腺嘌呤二核苷酸(Reduced flavin Adenine Dinucleotide;FADH2)的電子,而被還原,在分光光度儀下,其吸光值(600nm波長)的變化,來測算琥珀酸脫氫酶的活性。其反應方式為: |