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細胞抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性染色試劑

點擊次數:1517 發布時間:2015/4/7
提 供 商: 上海哈靈生物科技有限公司 資料大小:
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主要用途
細胞抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性染色試劑是一種旨在使用偶聯偶氮技術,在酸性環境和酒石酸存在的情況下, 呈現出紫紅色沉淀現象,來分析細胞樣本中酸性磷酸酶表達的而經典的技術方法。該技術由大師級科學家精心改良、成功實驗證明的。主要適用于動物原生代或培養細胞尤其是骨髓細胞和破骨細胞的酶活性檢測。可用于骨質細胞病理生理的研究的鑒定。產品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩定,靈敏牢固,顯色清晰。
技術背景
抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate resistant acid phosphatase;TRAP)是一種在哺乳動物內表達的糖化單體金屬蛋白酶,970多堿基,320多氨基酸,分子量為35kD。作為破骨細胞的標志,抗酒石酸酸性磷酸酶與破骨細胞調節的骨resorption活性和骨生成代謝有關。抗酒石酸酸性磷酸酶是以酶原形式合成,通過蛋白酶裂解和還原后活化。在酸性環境下,催化磷酸酯鍵的水解,產生醇和釋放磷酸。其特征性為酒石酸抗性而與其它酸性磷酸酶區別。抗酒石酸酸性磷酸酶在破骨細胞(osteoclast)、活化的巨噬細胞、神經細胞以及懷孕期的豬內皮層子宮內膜(endometrium)高度表達。在網狀內皮組織增殖(leukaemic reticuloendotheliosis)或毛細胞性白血病(hairy cell leukaemia)、戈謝病(Gaucher’s disease)、愛茲性腦病(HIV-induced encephalopathy)、骨巨細胞瘤(osteoclastoma)、骨質疏松癥(osteoporosis)和代謝性骨病等病人體內抗酒石酸酸性磷酸酶顯著增高。基于底物萘酚AS-MX磷酸鹽(naphthol AS-MX phosphate),在酸性環境和酒石酸(tartrate)存在的條件下,酸性磷酸酶催化其水解,釋放出萘酚(naphthol-AS),進而與重氮鹽耐曬紅紫(Fast red violet)偶聯,于是在酶的活動處形成不溶性紫紅色沉淀的偶氮染料,由此證明抗酒石酸酸性磷酸酶活性。其反應體系為: