主要用途
細胞內質網內鈣離子濃度熒光檢測試劑是一種旨在通過內質網鈣離子特異性熒光探針Mag-Fluo-AM,與鈣離子結合后,其熒光強度顯著增強,在熒光分光光度儀下觀察相對熒光峰值的變化,來測定內質網中總鈣離子濃度的而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種活體細胞(動物、人體等)內內質網鈣離子的濃度檢測。產品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩定,檢測敏感。
技術背景
鈣是人體中的一種重要電介質和礦物質,占1150克。其中99%的鈣以氟磷灰石鈣(calcium fluorophosphate apatite)形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細胞內。鈣具有兩種主要形式:一種是非彌散型蛋白結合鈣,其構成約40%至50%的血清中的總鈣含量;另一種為彌散型游離鈣,其進一步分成具有活性的復合鈣(complexed calcium)和離子鈣(ionized calcium)。鈣對神經肌肉興奮性(neuromuscular excitability)、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運輸、釋放神經傳導介質、信使傳導等方面起著重要作用。在細胞內,鈣離子主要儲存在線粒體和內質網等細胞器中。其中內質網鈣離子儲存在控制細胞活化、調控信號通路、蛋白分子轉錄后修飾,維持細胞內環境鈣離子平衡方面起著重要作用。內質網鈣的檢測包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法(flame photometry)、原子吸收分光光度法等技術,但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾,或者受限于儀器的特殊的要求,以及需要內質網純化。Mag-Fluo-AM染料是一種鈣離子低親和性的熒光標記染料,特異性地由內質網捕獲,可以檢測內質網內的游離鈣離子濃度的變化。在熒光分光光度儀下,激發波長490nm,散發波長525nm,來定量測定內質網的鈣濃度。 |