細胞采購的幾點注意事項

一、客戶收到細胞先不開蓋，放在培養箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議受收細胞時的培養基拍一張照片，觀察培養基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；細胞購買方式

二、如為貼壁細胞，請在顯微鏡下觀察細胞密度：

1. 未超過80%匯合度時，用75%酒精（建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水，噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作；然后打開蓋子，先用槍頭把培養基吸出10ml左右，放在離心管里，然后瓶口過火（嚴禁直接傾倒），這樣可以保證不污染，再用10ml的移液管，將剩余的培液全部吸出，放于離心管中，培養瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培養16hr(時間根據細胞生長情況調整）之后，傳代或者凍存。

2. 超過80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。具體步驟如下：

1) 棄去培養液，用3ml PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次；

2) 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于T25培養瓶中，倒轉放于37度培養箱1-3分鐘預熱，然后又將培養瓶倒轉大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養培養瓶，細胞隨即脫落下來；

3) 加入6-8ml*培養基，吸出，分到新的培養瓶中，按要求分瓶。

三、如為懸浮細胞，吸出培養液，1000轉/分鐘離心5分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。

注意：換液時一半用我們的培養基，一半用你們的，以免細胞不適應而造成生長不好。

四、細胞出現問題，不予以重發的情況有哪些？

（1）客戶造成細胞污染，不重發；

（2）客戶不正確操作致細胞狀態不好，不重發；

（3）非FDCC推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好，不重發；

（4）細胞狀態不好，未提供細胞培養前3天照片的，不重發；

（5）細胞培養時經其它處理的，不重發；

（6）細胞收到2天內，未告知，不重發；

（7）視具體情況而定。

五、細胞出現問題，可重發的情況有哪些？判定標準是什么？

（1）細胞運輸途中遭遇的各種問題，細胞丟失、破損、漏液等，重發；

（2）凍存的細胞復蘇后，絕大多數細胞未存活，重發；

（3）存活的細胞靜置24小時后，絕大多數細胞未存活，重發；

（4）凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封，出現污染，重發；

（5）視具體情況而定。

六、售后服務政策

細胞污染問題，請在收到產品48小時內，給我們提出真實的實驗結果；細胞活性問題，請在收到產品7天內給我們提出真實的實驗結果，我們調查核實后予免費調換，不收取任何費用。

需要客戶提供細胞培養說明、細胞操作處理方法、細胞質量問題反饋表;如果搞不清原因的，或者客戶直接愿意支付購買價5.0折的費用直接復蘇。

如用戶收到細胞8-30天之內，因處理不當造成細胞死亡或污染，我公司將以5.0折優惠價重新提供一株原細胞

細胞活力狀態用臺盼藍染色法鑒定細胞活力。