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DMEM培養基配置的方法以及注意事項
點擊次數:4810 更新時間:2013-09-18
 

  配制DMEM培養基過濾前和過濾后的NaHCO3,雙抗體可以添加,也可以不加,能加入漿液過濾,在好的或,見細胞和血清濃度,不同,不同的細胞需要的同時,凍存細胞需要培養基血清含量較高,一般為20%-30%。此外,包裝后的培養基和血清過濾,除了被用于一瓶,其他存儲在-20度,或一部分,如谷氨酰胺易降解。

  

  配制DMEM培養基可以先用后的體積是2/3的水溶解配制,包裝袋也需要清洗。2G*溶解的碳酸氫鈉此外,加雙抗后,定容至終體積。過濾到零下20攝氏度保存。添加血清的時候。

  

  根據我的經驗,配制DMEM培養基正常血清沒有過濾,雙抗體不需要過濾,可添加在前面(如果需要的話,除非雙反)培養基的罕見的內容,否則就不需要在零下20攝氏度保存,培養兩周跑出去不在4存儲任何問題。另外,我不同意與冷凍細胞明顯高于血清,沒有根據。在ATCC細胞凍存的描述看,我很少使用血清,一般10%二甲基亞砜+90%和冷凍液配方血清中是常用的。凍存存活率*的細胞。(當然,冷凍也是非常重要的存儲過程)

  

  配制DMEM培養基時血清不必要過濾,但我認為雙反應進行過濾,畢竟,是不是很麻煩。同時對細胞冷凍血清添加量存在著一定的問題,重要的是冷凍程序,如離心速度不太大,有二甲基亞砜的量不能超過10%,這是非常重要的。

  

  配制DMEM培養基除了DMEM粉末直接加入,也應按照說明書添加碳酸氫鈉適量,它是關于2G,pH值可能遠大于你所需要的pH值,再加入適量HEPES,約2.38g,pH滿意度,根據需要添加雙抗,過濾,分裝。如果數量不多,儲存超過20度,必要時添加血清,血清是不需要消毒,因為合格血清已達到無菌的條件下,搖它