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ELISA試劑盒加底物顯色以及間接法
點(diǎn)擊次數(shù)：1419 更新時(shí)間：2013-08-21
 

        ELISA試劑盒間接法之所以能成功關(guān)鍵點(diǎn)是純度和抗原。雖然有些時(shí)候使用粗提抗原包被也能夠獲取實(shí)際有效的檢測(cè)結(jié)果，但是應(yīng)該盡量給予純化，這樣一來(lái)就可以提高ELISA試驗(yàn)的特異性。

 

        特別要注意的是除了能與普通健康人血清產(chǎn)生反應(yīng)的雜質(zhì)，比如以腸埃希氏菌作為工程酶的重組抗原，又比如其中含有腸埃希氏菌的成份，極有可能和受過(guò)腸埃希氏菌感染者血清中的抗腸埃希氏菌抗體之間產(chǎn)生反應(yīng)。

 

        與酶標(biāo)抗人Ig反應(yīng)的物質(zhì)也可以在抗原中，如果抗原來(lái)源于人血漿或者是人體組織，假設(shè)您不將其中的Ig抹去，試驗(yàn)的過(guò)程中也會(huì)發(fā)生假陽(yáng)性的一系列反應(yīng)。還有就是如果有包含無(wú)關(guān)蛋白的抗原，也會(huì)因?yàn)榫範(fàn)幬綄?dǎo)致包被效果的不準(zhǔn)確。

 

        普通血清中所含的高濃度的非特異性抗體是簡(jiǎn)介法中的另一種干擾因素。在病人血清中受檢的特異性血清中免疫球蛋白主成分只占總IgG中的小部分。

 

        血清中免疫球蛋白主成分的吸附性很強(qiáng)，非特異血清中免疫球蛋白主成分可直接吸附到固相載體上，也可吸附到包被抗原的表面。所以在間接法中抗原包被后一般用無(wú)關(guān)蛋白質(zhì)（例如BSA）再包被一次，以封閉堵塞固相上的空余縫隙。還有在檢測(cè)的過(guò)程中標(biāo)本必須先金星稀釋?zhuān)糜诒苊膺^(guò)高的陰性本底導(dǎo)致判斷結(jié)果的偏差！

 

        ELISA試劑盒加底物顯色這種方法主要是對(duì)病原體抗體的檢測(cè)而進(jìn)行傳染病的診斷。間接法的優(yōu)勢(shì)是只需要變動(dòng)包被 抗原就可以用同一酶標(biāo)抗抗體檢測(cè)相應(yīng)抗體的方法。