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全面解讀：抗體選擇指南，值得珍藏
點擊次數：186 更新時間：2024-08-19
 


避免同種系物種的一抗選擇

- 避免同種系干擾：在進行小鼠樣本檢測時，應避免使用小鼠或大鼠來源的一抗。

- 原因：防止二抗與樣本中的內源性免疫球蛋白發生交叉反應，導致背景信號過高。

稀有樣本種屬的抗體選擇策略

- 免疫原序列查詢：對于市面上難以找到驗證過的抗體，如豬、牛等，可以通過查詢抗體的免疫原序列，并與待測蛋白進行同源性分析。

- 同源性標準：若同源性超過90%，可以嘗試使用，但需注意，這種情況下，廠家通常不提供質保。

- 同源性分析方法：詳見下方視頻教程。

- 商業機密問題：對于某些品牌，如CST，免疫原序列可能屬于商業機密。此時，可以提供自己的蛋白序列，請求廠家專家幫助分析同源性并給出使用建議。


實驗方法確認


確認抗體適用性

- 實驗方法標注：檢查抗體說明書上的實驗方法（application），確保包含您計劃進行的實驗類型。

- WB實驗簡便性：如果僅進行Western Blot（WB），選擇在說明書中標注WB的抗體即可。

- 多實驗方法選擇：建議選擇實驗方法多樣的抗體，以便未來進行其他類型實驗時無需重復購買。

- 免疫組化（IHC）注意事項：若進行IHC，需確認樣本類型（如石蠟切片、冰凍切片或細胞）是否已由廠家驗證。未經驗證的樣本類型通常不提供質保。