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石蠟切片蘇木素伊紅染色試劑盒說明書
點擊次數:645 更新時間:2023-08-24
 

主要用途

 

石蠟切片蘇木素伊紅染色試劑是一種旨在使用標準化的化學分離石蠟處理,進而使用蘇木素伊紅染料分別對組織細胞核和細胞漿進行染色,以觀察存檔中的石蠟包埋的組織切片中組織細胞結構的而經典的廣譜染色技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。優化了HarrisMayer適用于各種石蠟包埋組織切片,包括各種生理和病理組織切片,以及固著在福爾馬林或非交聯固著劑的組織。產品嚴格無菌,即到即用,使用方便,性能穩定,透明度好,著色清晰。

 

技術背景

 

作為細胞結構染色劑之一的蘇木素Hematoxylin和伊紅Eosin已被證明是病理組織切片良好的染色液之一。蘇木素是染色細胞核的,而伊紅染色細胞漿的。染色后細胞核呈現藍色,細胞漿呈現粉紅色或紅色。染料滲透性強染色透明度好,核漿對比鮮明組織細胞結構清晰可辨染色后可以進行后續免疫熒光染色或其它染料的染色。 

 

產品內容

 

蠟液Reagent A         毫升

補水液AReagent B         毫升

補水液BReagent C             毫升

補水液CReagent D         毫升

補水液DReagent E         毫升

清理液Reagent F         毫升

染色液AReagent G           毫升

染色液BReagent H           毫升

染色液CReagent I           毫升

染色液DReagent J           毫升

染色液EReagent K           毫升

染色液FReagent L          毫升

染色液GReagent M          毫升

染色液HReagent N          毫升

產品說明書             1

 

保存方式

 

保存在室溫下,染色液CReagent I和染色液EReagent K避免光照,試劑具有揮發性,注意密閉瓶蓋;有效保證6

 

 

 

用戶自備

 

小型染色缸:用于切片的染色操作

光學顯微鏡:用于組織細胞染色后觀察分析

 

實驗步驟

 

一、 蠟處理

 

1. 取出10片待測的石蠟包埋的組織切片(注意:石蠟包埋前,組織切片須用10%甲醛4℃條件下,固定16小時,此步很重要

2. 放進80℃烘箱,孵育30分鐘

3. 室溫下靜置15分鐘

4. 按下表依次放進小染色缸里孵育

染色缸 

孵育時間 

xx毫升蠟液Reagent A  

15分鐘

xx毫升蠟液Reagent A 

15分鐘

xx毫升蠟液Reagent A 

15分鐘

xx毫升補水液AReagent B 

3分鐘

xx毫升補水液BReagent C 

3分鐘

xx毫升補水液CReagent D 

3分鐘

xx毫升補水液DReagent E  

3分鐘

 

5. 小心移去切片上的補水液DReagent E 

6. 小心加上xx微升清理液Reagent F在切片上,鋪滿整個切片樣品表面

7. 室溫下孵育5分鐘

8. 小心移去切片上的清理液Reagent F 

 

二、 染色處理

 

1. 準備16個能容納20毫升染色液以及切片大小的染色缸

2. 按下表順序依次倒入xx毫升各種染色液染色缸里

3. 用鑷子輕輕夾住切片邊角,按下表依次放進小型染色缸里,在室溫下按規定時間孵育(不要松開鑷子);在移到下一個染色缸前,將切片邊緣放在吸水綿紙上少許時間,吸去染色液,然后放進下一個新的染色缸里孵育。

 

 

4. 晾干后,在光學顯微鏡下觀察:細胞核呈現藍色,細胞漿呈現粉紅色或紅色組織細胞結構清晰可辨

5. 可以進行后續免疫熒光染色或其它染料的染色。 

 

注意事項

 

1. 本產品為50操作

2. 在整個操作過程中須戴手套

3. 試劑具有揮發性,注意密閉瓶蓋

4. 石蠟包埋前,組織切片須用10%甲醛4條件下,固定16小時,否則造成樣品支離破碎

5. 所有操作在室溫下進行

6. 每次更換試劑溶液時,保持切片面基本晾干。空氣中晾干狀態為沒有水滴,呈濕潤狀態,可見反光

7. 試劑可以重復使用

8. 組織細胞染色完成后,即刻進行光學顯微鏡觀察

9. 染色后切片可以放進載玻片盒里長久保存

10. 本公司提供系列細胞染色試劑產品

 

質量標準

1. 本產品經鑒定性能穩定

2. 本產品經鑒定透明度好

3. 本產品經鑒定著色清晰