純化線粒體凍存液產品說明書

主要用途

 純化線粒體凍存液是一種旨在幫助冷凍環境下儲存各種分離的純化線粒體（人體和動物等），確  保其膜完整性、維持新鮮狀態的超微結構和生物學功能的保護性介質。該溶液由大師級科學家精心研制、  成功實驗證明的。產品嚴格無菌， 即到即用， 性能穩定， 無病毒和支原體， 維護線粒體活力高達 95％以上。

技術背景

凍存保護（Cryopreservation）是長期儲藏和保存生物活體材料的基本手段。但是，在凍存過程中活體將受 到物理或化學性傷害諸如冰結晶體的形成、滲透壓的變化以及化學物毒性等，尤其是致命性的活體內冰產 生， 所導致牽延和縮水等物理性損傷。作為凍存保護劑之一的丙三醇（Glycerol）被證實能夠阻止冰晶體的 發生。根據線粒體的生物學需求， 凍存溶液含有海藻糖（Trehalose），一種天然性二糖， 在植物中幫助共生 的物質， 且防止脫水。在線粒體保存中， 維護膜完整性、維持新鮮狀態下的超微結構和生物學功能達到 95 %以上，包括 ATP 合成，膜電位，鈣誘導性腫脹等。

產品內容

 凍存液（Reagent A）

產品說明書

保存方式

保存  凍存液（Reagent A）在－20℃的冰箱里，有效保證 6 月

用戶自備

1.5 毫升離心管：用于線粒體收集后離心

4℃微型臺式離心機：用于沉淀線粒體

2 毫升凍存管：用于線粒體冷凍儲藏

實驗步驟

實驗開始前， 將試劑盒里的  凍存液（Reagent A）從－20℃的冰箱里取出， 置于室溫下溶化。然 后進行下列操作。

1 ． 將分離純化的 500 微升線粒體懸液（50 毫克/毫升）移入到 1.5 毫升離心管

2 ． 放進 4℃微型臺式離心機離心 5 分鐘，速度為 16000g（或 13000RPM，例如 EPPENDORF 5415） 3 ． 小心抽去上清液

4 ． 加入 xx 微升  凍存液（Reagent A）

5 ． 輕輕混勻顆粒群

6 ． 分批 50 微升移入到干冰預冷的凍存管里

7 ． 即刻放進液氮罐里快速冷凍

8 ． 24 小時后，放進－70℃的冰箱里保存

注意事項

1． 本產品為 50 毫升規格

2． 所有凍存操作和使用工具均須在嚴格無菌狀態下進行

3． 操作時，避免污染母液

4． 如果線粒體懸液容量低于 xx 微升，可以直接加入  凍存液（Reagent A） 

5． 凍存管線粒體凍存量可以達到每毫升 50 毫克

6． 凍存和解凍的基本原則是冷凍速度快速（放進液氮后快速冷凍， 再放進－70℃冰箱里保存），解凍速度 快速（用手捂熱解凍）

7． 本產品可以部分保護部分線粒體生物能量學功能

8． 本公司提供系列細胞凍存產品

質量標準

1 ． 本產品經鑒定性能穩定

2 ． 本產品經鑒定無病毒和支原體污染

3 ． 本產品經鑒定維護線粒體活力高達 95％以上