冰凍切片彈性纖維（ELASTIC）偉郝夫范吉森（Verhoeff-Van Gieson）染色試劑是一種旨在使用標(biāo)準(zhǔn)化的

化學(xué)脫蠟方法和偉郝夫（Verhoeff）蘇木素以及媒染劑氯化鐵，分析和區(qū)分冰凍組織切片中的彈性纖維的

而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心改良傳統(tǒng)方法、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適用于皮膚、腎臟、動脈組織等

染色。廣泛運(yùn)用于動脈硬化、肺氣腫、血管病變和衰老等引起的彈性纖維異常等研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即

到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，顯色清晰。 技術(shù)背景

彈性纖維（elastic fiber），又稱為黃色纖維（yellow fiber），是固有結(jié)締組織（Connective tissue proper）細(xì)胞

外基質(zhì)的成分之一，由平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞產(chǎn)生彈力蛋白質(zhì)（elastin）、原纖維蛋白（fibrillin；FBN）

等構(gòu)成。彈性纖維具有可伸展性。存在于皮膚、肺、動脈、靜脈、彈力軟骨、牙周韌帶（periodontal ligament）、

脂肪組織中。彈性纖維缺失導(dǎo)致皮膚松弛癥（cutis laxa）、威廉姆斯綜合征（Williams Syndrome）等疾病。

基于偉郝夫范吉森（Verhoeff-Van Gieson；VVG）的發(fā)明，應(yīng)用遞減性（regressive）蘇木素選擇性染色彈

性纖維，通過媒染劑氯化鐵，幫助區(qū)別其它包括肌肉、膠原纖維、纖維蛋白（fibrin）等組織成分。偉郝夫

范吉森方法操作簡便，凸顯彈性纖維，難以細(xì)致區(qū)分其它組織成分。 產(chǎn)品內(nèi)容

清理液（Reagent A） 毫升

固著液（Reagent B） 毫升

染色液（Reagent C） 毫升

媒染液（Reagent D） 毫升

穩(wěn)定液（Reagent E） 毫升

復(fù)染液（Reagent F） 毫升

產(chǎn)品說明書 1 份

保存方式

保存在 4℃冰箱里，避免光照；試劑具有腐蝕性，注意安全；有效保證 3 月

用戶自備

小型玻璃染色缸：用于組織或切片處理的容器

中性樹脂：用于切片封片

光學(xué)顯微鏡：用于切片染色后觀察分析

實(shí)驗(yàn)步驟

一、 樣品固著處理

1． 準(zhǔn)備好 5 微米厚的冰凍切片

2． 小心加上 xx 微升清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面

3． 室溫下孵育 2 分鐘

4． 小心移去切片上的清理液（Reagent A）

5． 小心加上 xx 微升固著液（Reagent B）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面

6． 室溫下孵育 5 分鐘

7． 小心移去切片上的固著液（Reagent B）

8． 小心加上 xx 微升清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面

9． 室溫下孵育 2 分鐘

10．小心移去切片上的清理液（Reagent A）

二、 樣本染色處理

1． 小心加入 xx 微升染色液（Reagent C）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面

2． 室溫下孵育 60 分鐘，避免光照（注意：組織切片呈現(xiàn)黑色）

3． 小心移去染色液（Reagent C）

4． 室溫下，小心將切片置入 xx 毫升清理液（Reagent A）中孵育 2 分鐘

5． 小心移去切片上的清理液（Reagent A）

6． 小心加入 xx 微升媒染液（Reagent D）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面

7． 室溫下孵育 2 分鐘，直至肉眼或顯微鏡下觀察背景呈現(xiàn)灰色，避免光照（注意：避免過度去色）

8． 小心移去媒染液（Reagent D）

9． 室溫下，小心將切片置入 x 毫升清理液（Reagent A）中孵育 2 分鐘

10．小心移去切片上的清理液（Reagent A）

11．小心加入 xx 微升穩(wěn)定液（Reagent E）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面

12．室溫下孵育 1 分鐘

13．小心移去穩(wěn)定液（Reagent E）

14．室溫下，小心將切片置入 xx 毫升清理液（Reagent A）中孵育 2 分鐘

15．小心移去切片上的清理液（Reagent A）

16．小心加入 xx 微升復(fù)染液（Reagent F）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面

17．室溫下孵育 5 分鐘

18．小心移去復(fù)染液（Reagent F）

19．室溫下，小心將切片置入 xx 毫升清理液（Reagent A）中孵育 2 分鐘

20．小心移去切片上的清理液（Reagent A）

21．（選擇步驟）透明澄清處理

22．放上蓋玻片或封片（中性樹脂）

23．即刻在一般光學(xué)顯微鏡下觀察：

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注意事項(xiàng)

1． 本產(chǎn)品為 50 次操作

2． 操作時，須戴手套

3． 試劑具有腐蝕性，注意操作安全

4． 建議使用玻璃染色缸

5． 每次更換試劑溶液時，保持切片面基本晾干

6． 試劑溶液在切片表面時，避免有氣泡存在，同時確保鋪滿切片表面

7． 整個操作，在避光狀態(tài)下進(jìn)行

8． 染色完成后，即刻進(jìn)行光學(xué)顯微鏡觀察

9． 樣品染色后保存，避免光照

10．本公司提供系列特定組織染色試劑產(chǎn)品

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

1． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定

2． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定顯色清晰