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PicoGreen雙鏈DNA熒光定量測(cè)定試劑盒產(chǎn)品說明書
點(diǎn)擊次數(shù):2217 更新時(shí)間:2022-03-18
 

PicoGreen雙鏈DNA熒光定量測(cè)定試劑盒產(chǎn)品說明書(簡(jiǎn)版)

詳細(xì)版可以問我們?nèi)斯た头魅?/span>

主要用途

 

 PicoGreenDNA熒光定量測(cè)定試劑是一種旨在通過使用PicoGreen熒光染料與樣品中雙鏈DNA的高度特異性結(jié)合而產(chǎn)生熒光信號(hào)來精確定量樣品中DNA含量的經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的其適用于各種原核生物和真核生物的細(xì)胞或組織DNA以及環(huán)境中DNA含量分析。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,性能穩(wěn)定,高度敏感。

 

技術(shù)背景

 

作為DNA染色劑之一的PicoGreen熒光染料特異性地樣品中雙鏈DNA結(jié)合,產(chǎn)生熒光信號(hào)。PicoGreen技術(shù)可以檢測(cè)到低達(dá)0.5納克雙鏈DNA的變化。DNA的微量增加引起熒光信號(hào)強(qiáng)度(Intensity)或相對(duì)熒光單位(RFU)的顯著增加。其自發(fā)熒光(Autofluorescence)忽略不計(jì),重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)差異(Standard Deviation)低,不受樣品化學(xué)成分的干擾。

 

產(chǎn)品內(nèi)容

 

染色液Reagent A                      62.5微升

稀釋液(Reagent B                       15 毫升

標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent C                            1

產(chǎn)品說明書                                 1份

 

保存方式

 

保存染色液Reagent A)和標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent C在-20℃冰箱里,其余的保存在4冰箱里,染色液(Reagent A)避免光照有效保證6

 

用戶自備

 

1.5毫升離心管:用于工作液配制的容器

比色皿或96孔板:用于熒光分析的容器

熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀:用于熒光定量分析

 

實(shí)驗(yàn)步驟

 

一、 測(cè)定準(zhǔn)備

 

1. 準(zhǔn)備好待測(cè)樣品,置于冰槽里

2. 設(shè)定好熒光分光光度儀(溫度為37℃):激發(fā)波長(zhǎng)480nm,散發(fā)波長(zhǎng)530nm,并置零 

3. 實(shí)驗(yàn)開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的染色液(Reagent A置于冰槽里融化。然后移出5毫升稀釋液(Reagent B到新的15毫升離心管,加入25微升染色液(Reagent A,混勻后,用錫紙包裹,標(biāo)記為染色工作液,放在暗室里。然后進(jìn)行下列操作。

 

二、 構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線

 

1. 準(zhǔn)備好5個(gè)1.5毫升離心管,標(biāo)記為15號(hào)管

2. 分別加入500微升稀釋液(Reagent B到每個(gè)離心管

3. 移取500微升標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent C1號(hào)管,混勻

4. 小心移取500微升1號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent C2號(hào)管,混勻

5. 小心移取500微升2號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent C3號(hào)管,混勻

6. 小心移取500微升3號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent C4號(hào)管,混勻

7. 15號(hào)管放進(jìn)冰槽里備用;標(biāo)準(zhǔn)管含量見下表